紅細胞裂解液說(shuō)明書(shū)

紅細胞裂解液

Cat NO : NH4CL2009 規格 ：100 mL

產(chǎn)品簡(jiǎn)介： 本裂解液有別于市場(chǎng)上銷(xiāo)售的其它紅細胞裂解液，其配方經(jīng)過(guò)本公司優(yōu)化在裂解紅細胞的同時(shí)不損傷并在一定程度上保護淋巴細胞(lymphocyte)或其它有細胞核的細胞，所獲得的細胞可保持完好的生物活性和完整的細胞形態(tài)。另外，本裂解液中無(wú)DNA及RNA酶，配合細胞分離液使用所提細胞可廣泛用于細胞培養及分子生物學(xué)實(shí)驗，請廣大用戶(hù)從優(yōu)選擇。 紅細胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)，也稱(chēng)ACK Lysis Buffer，是一種用于從人或鼠等的血液或組織細胞樣品中裂解并去除無(wú)細胞核紅細胞的溶液。 本裂解液不適用于有細胞核紅細胞的裂解，例如鳥(niǎo)或禽類(lèi)的紅細胞。本裂解液經(jīng)過(guò)無(wú)菌處理，處理過(guò)的血液或組織細胞樣品可以用于后續的原代培養、細胞融合以及核酸或蛋白的提取及各種常規的分析和檢測。 保存條件： 常溫避光保存，有效期一年。 注意事項： 本裂解液為無(wú)菌產(chǎn)品，請注意保持無(wú)菌，使用本產(chǎn)品時(shí)宜在超凈工作臺內進(jìn)行。 如果經(jīng)過(guò)紅細胞裂解液處理后的樣品后續用于總RNA的提取，在處理細胞時(shí)不必使用經(jīng)過(guò)DEPC處理過(guò)的溶液。為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。 使用說(shuō)明： 裂解過(guò)程及離心需在4℃的條件下進(jìn)行。 對于細胞懸液樣品：
1. *次裂解，加入5-8倍細胞體積的紅細胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解2min。
2. 300g離心10min，棄紅色上清。
3. 如果發(fā)現紅細胞裂解不*，可以重復上述步驟1、2步進(jìn)行短時(shí)多次裂解。但后續每次加入的紅細胞裂解液為上一次的一半，但zui少不能低于2ml。裂解液減少到只剩余2ml時(shí)，每次裂解結束，需先加入10ml PBS進(jìn)行終止，并300g離心10min，棄紅色上清。直至紅細胞裂解*，裂解結束。通常極微量的紅細胞不會(huì )影響后續的一些檢測。
4. 洗滌1-2次：加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無(wú)血清培養液，重懸沉淀，300g離心5min，棄上清。洗滌液的用量通常應至少為細胞沉淀體積的5倍。

5. 根據實(shí)驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀后即可進(jìn)行計數等后續實(shí)驗。
對于血液樣品：
1. 取新鮮抗凝血，400-500g離心5min，離心棄血漿。
2. *次裂解，加入5-8倍細胞體積的紅細胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解2min。
3. 300g離心10min，棄紅色上清，留沉淀。
4. 如果發(fā)現紅細胞裂解不*，可以重復上述步驟2、3步進(jìn)行短時(shí)多次裂解。但后續每次
加入的紅細胞裂解液為上一次的一半，但zui少不能低于2ml。裂解液減少到只剩余2ml時(shí)，
每次裂解結束，需先加入10ml PBS進(jìn)行終止，并300g離心10min，棄紅色上清。直至紅
細胞裂解*，裂解結束。通常極微量的紅細胞不會(huì )影響后續的一些檢測。
5. 洗滌1-2次：加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無(wú)血清培養液，重懸沉淀，300g離心5min，
棄上清。洗滌液的用量通常應至少為細胞沉淀體積的5倍。
6. 根據實(shí)驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀后即可進(jìn)行計數等后續實(shí)驗。
注意：對于微量或少量的血液樣品，可以在*步中不進(jìn)行離心棄上清的操作，直接在第二
步中加入10倍血液體積的紅細胞裂解液，進(jìn)行裂解。對于鼠的血液，裂解時(shí)間稍短，對于人
的外周血，宜延長(cháng)裂解時(shí)間，具體裂解時(shí)間需客戶(hù)自行摸索，以達到*裂解效果。裂解過(guò)
程中宜適當搖動(dòng)以促進(jìn)紅細胞裂解。