單個(gè)核細胞分離液系列

1. 適用于各種動(dòng)物血液及組織本系列產(chǎn)品檢索：

  貨號                        名稱(chēng)                       規格     

2. 使用方法說(shuō)明及圖例

2.1血液樣本分離液使用說(shuō)明及圖例

A. 小量分離-使用 1-2ml 新鮮抗凝血（分離圖例見(jiàn)圖例 1）：

a.取新鮮抗凝血1-2ml，與全血及組織稀釋液（Cat#：2010C1119）1:1混勻；

b.小心加于與混合液等體積的細胞分離液之液面上；

c.以400g（約1500轉/分）離心15分鐘（半徑15cm水平轉子）；

此時(shí)離心管中由上至下細胞分為四層。*層；為血漿層。第二層；為環(huán)狀乳白色單

個(gè)核細胞層。第三層；為透明分離液層。第四層；為紅細胞層。收集第二層細胞放入含4-5ml 細胞洗滌液（Cat#：2010X1118）的試管中，充分混勻后，以500g（約1800轉/分）離心20 分鐘，棄去上清留沉淀細胞重新懸起。重復洗滌2次即得所需單個(gè)核細胞。

B. 中量分離-使用 5-10ml 新鮮抗凝血（分離圖例見(jiàn)圖例 1）：

a.取新鮮抗凝血5-10ml，與全血及組織稀釋液（Cat#：2010C1119）1:1混勻；

b.將混合液小心疊加于細胞分離液之液面上（混合液：分離液=2：1）；

c. 以 500g（約 1800 轉/分）離心 15 分鐘（半徑 15cm 水平轉子）；

此時(shí)離心管中由上至下細胞分為四層。*層；為血漿層。第二層；為環(huán)狀乳白色單

個(gè)核細胞層。第三層；為透明分離液層。第四層；為紅細胞層。收集第二層細胞放入含10ml 細胞洗滌液（Cat#：2010X1118）的試管中，充分混勻后，以500g（約1800轉/分）離心20 分鐘，棄去上清留沉淀細胞重新懸起。重復洗滌2次即得所需單個(gè)核細胞。

C. 大量分離 I-使用 20ml 新鮮抗凝血（分離圖例見(jiàn)圖例 2）：

a.取新鮮抗凝血20ml以200g（約1100轉/分）離心20分鐘棄去血漿；

b.向棄去血漿的血細胞中加入全血及組織稀釋液（Cat#：2010C1119）12ml小心混勻；

c.將混合液小心疊加于細胞分離液之液面上（混合液：分離液=2：1）；

d. 以 600g（約 2000 轉/分）離心 15 分鐘（半徑 15cm 水平轉子）；

此時(shí)離心管中由上至下細胞分為四層。*層；為血漿層。第二層；為環(huán)狀乳白色單個(gè)

核細胞層。第三層；為透明分離液層。第四層；為紅細胞層。收集第二層細胞放入含 20ml 細胞洗滌液（Cat#：2010X1118）的試管中，充分混勻后，以500g（約1800轉/分）離心20 分鐘，棄去上清留沉淀細胞重新懸起。重復洗滌2次即得所需單個(gè)核細胞。

D. 大量分離 II-使用 50ml 新鮮抗凝血（分離圖例見(jiàn)圖例 3）：

a.取新鮮抗凝血50ml與HES-TBD550液1:1混合后再與1份注射用生理鹽水混勻20‡-30

‡靜置20-30分鐘。吸取混濁的上清液備用，棄去底部紅細胞。

b.將步驟1中留取的上清液以200g（約1100轉/分）離心20分鐘棄去上清保留沉淀細

胞；

c.向沉淀的細胞中加入全血及組織稀釋液（Cat#：2010C1119）20ml小心混勻；

d.將混合液小心疊加于細胞分離液之液面上（混合液：分離液=2：1）；

e. 以 600g（約 2000 轉/分）離心 15 分鐘（半徑 15cm 水平轉子）；

此時(shí)離心管中由上至下細胞分為四層。*層；為血漿層。第二層；為環(huán)狀乳白色單個(gè)

核細胞層。第三層；為透明分離液層。第四層；為紅細胞層。收集第二層細胞放入含 20ml

細胞洗滌液（Cat#：2010X1118）的試管中，充分混勻后，以500g（約1800轉/分）離心20

分鐘，棄去上清留沉淀細胞重新懸起。重復洗滌2次即得所需單個(gè)核細胞。

注：提取率約為80%。